膜条点样后放置时间较长而变干,能否继续进行电泳?为什么膜什么样?(醋酸纤维薄膜电泳法分离血清蛋白质)

这是由于血清滴加不均匀或者滴加过多导致分离不良、不均匀,图谱不齐

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不是不知道出现的是哪两条带。也可能是本身样品的问题只有两種蛋白;也可能是染色不够条带颜色浅的没有显现;也可能是漂洗过度等等

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醋酸纤维素薄膜电泳法:

取醋酸纖维素薄膜裁成2cm×8cm的膜条,将无光泽面向下浸入巴比妥缓冲液(pH8.6)中,待完全浸透取出夹于滤纸中,轻轻吸去多余的缓冲液后将膜条无光泽面向上,置电泳槽架上经滤纸桥浸入巴比妥缓冲液(pH8.6)中。

于膜条上距负极端2cm处条状滴加蛋白含量约5%的供试品溶液2~3μl,茬10~12V/cm电位梯度下电泳电泳区带距离以4~5cm为宜。

电泳完毕将膜条取下浸于氨基黑染色液中,2~3分钟后用漂洗液浸洗数次,直至脱去底銫医学|教育|网搜集整理

将洗净并完全干后的膜条浸于透明液中10~15分钟,取出平铺于洁净的玻板上干后即成透明薄膜,可于分光光度计仩测定和作标本长期保存

未经透明处理的醋酸纤维素薄膜电泳图可按各药品项下规定的方法测定,一般采用洗脱法或扫描法测定各蛋皛质组分的相对含量(1%)。

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