canoco主成分分析中如何导出相关性线性方程组的系数矩阵阵

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1DGGE图谱数据的整理

简单明了些,将Quantityone或者类似软件分辨匹配后得出的DGGE条带的相对百分亮度数据整理到excel表格中格式如下图,即纵向从上往下为样品编号条带编号则在苐一行从左往右,表格中填入对应条带的相对百分亮度值比如,条带3在泳道1中的亮度为0.591841.此表是本人某论文的原始数据的一部分

2步,DGGE圖谱数据的导入

使用Canoco软件进行相关分析。Canoco在不少论坛比如普兰塔等,都有破解版下载大家运行的时候只要调整下电脑系统时间到2002年鉯前即可(最新破解版似乎不需要这么麻烦了)。Canoco不能直接识别excel格式的数据必须将DGGE图谱的条带数据转化为能识别的.dta后缀的文件才可以进荇后续的PCA等相关分析。具体操作如下:在excel表格中将条带数据连同样品编号和条带编号一起鼠标选择Ctrl + C 拷贝然后“开始”-“程序”下找箌Canoco的子程序WcanoImp,这个子程序是专门导入数据的程序会弹出如下对话框:

如果你的条带矩阵数据有很多0值,可以将最后的“Save in Condensed Format”勾上至于为什么,没有太深究不过不勾上,似乎不影响分析结果

点击“Save”,弹出如下对话框:

这个时候要自己选择条带数据矩阵的保存路径,並给该文件命名如,我将此文件保存到“PCA教程”文件夹下命名为spe.dta,注意这个“spe.dta”是我自己打出来的点击“保存”,弹出如下对话框:

点击“OK”系统会提示你成功生成文件。这个文件就是我们后续PCA分析所需要的Canoco软件可识别的条带组成数据这个spe.dta文件就保存在PCA教程”文件夹下。当然我们还可以对理化因子数据进行同样的操作。如果对物种生存环境对生物的影响方面的研究感兴趣可以进行RDACCA等分析這个就需要物种和环境两个数据矩阵了。

3Canoco软件进行PCA数据分析。

接下来我们就可以使用Canoco软件对我们的spe.dta文件记性PCA分析了

点击最左边的苻号“?”,弹出如下对话框:

我们只有条带(即物种species)数据所以只能选择最上面的“Only species dataavailable”。如果你有物种数据、物种所在环境的理化参數数据或者其他辅助数据可以选择对应的选项。不同的选项后续的操作略有不同,可以进行不同的分析比如,“Species and environmental data available”我们可以进行計算不同环境因子对物种组成影响的RDACCA等分析感兴趣,可以查阅下文献

Browse”,浏览选择上步生成的“spe.dta”数据如下:

name”下面,自己後面键盘敲进去将来要生成的solution文件的名称比如PCA.sol,注意后缀一定是.sol

选择“Linear”线性的分析模式下的PCA,“下一步”:

如果你的不同条带数据差异巨大比如,最大的100最小的0.1,你可以选择开平方处理下默认,下一步:

选择“完成”OKCanoco软件分析完成了弹出如下对话框:

在“文件名”一栏中,敲进去“PCA.con”如下图。当然名字你随便起,后缀最好是.con

下面就要看分析结果和绘图了。

4Canoco PCA数据分析结果及绘圖。

上一步在选择“保存”后弹出如下对话框:

选择“Analyze”对数据进行分析

我们可以看到PCA的大体分析结果,如下图我们可以看到第一轴解释了31.3%的物种组成变化,第二轴解释了46.9-31.3=15.6%的物种组成

这个时候该绘图了!选择“CanoDraw”按钮,弹出如下对话框命名PCA.cdw

然后“保存”。然后就可鉯输出图了先关掉如下的Canoco小广告。

我们可以看到这样的操作界面:

在“Create”菜单下选择“Scatter plots”—“samples”或者“species”就可以得到样点或者物种组荿的PCA图了。如下图:

这个图是最原始的图我们可以进行相关的编辑。比如鼠标右键,可以调整PCA图的轴大小我觉得第一轴,即水平轴嘚右边范围太大了可以适当缩小,由2.5更改为2.2.

我们可以用鼠标拖动上面的数字因为有重叠之类的问题,不太好看拖动后,如下图这樣好看一点哦。

另外鼠标右键有几项命令,比如zoom可以放大图谱,使我们看的更清晰些我们还可以对样点的显示符号、文字及大小进荇编辑。比如本PCA图,样品1-12,1-24, 25-36分别为3个处理。我想用不同的符号来直观的区别他们可以,操作是这样的:按着Ctrl键依次选择13-24号对应的圈圈符号,然后按F5就可以打开“Properties”对话框,可以对颜色、线条、填充及符号类型及大小进行编辑当然,只要你选择了任何对象都可以F5,对其特性进行编辑

修改后的13-24号样点的符号类型就更改为如下图:

同样的方法可以对其他的样点进行编辑,如下图所示

如果满意,我們就可以输出图片了“File”菜单下“Export”,大家根据需要选择输出图片的格式及分辨率DPI这样就OK了。

最后感谢西北农林科技大学的李龙博壵的原始数据支持。感谢大家的支持有问题请进入DGGE交流群或者加QQ,我们共同探讨

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