WOW众神谁的IPjs 数字相乘乘

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【求助】co-ip结果图不会看,求大神帮忙
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这个帖子发布于2年零161天前,其中的信息可能已发生改变或有所发展。
问题已解决悬赏丁当:5
这是一篇文章中的co-ip结果,文中说这个结果表明lncrna-p21不能同时与VHL和HIF-1a蛋白结合。但是图我实在看不懂,不知道里面这些anti-flag,anti-GFP等等分别代表什么有什么作用。。应该怎样来读这个图呢?请大神帮忙解答,谢谢!
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lncrna-p21,左图未见到。anti-flag是指用flag标签抗体来进行IP;因为HIF-1a上带有flag标签,用flag进行IP就相当于使用HIF-1a进行IP;anti-GFP是指用GFP标签抗体来进行IP;因为VHL上带有GFP标签,用GFP就相当于用VHL进行IP。我不明白IP为什么分为第一次IP和第二次IP。对于第一次IP的最后混合物进行WB,可见到VHL和HIF-1α的条带,说明二者有相互作用;对于第二次IP,我是很明白,难道是对第一次IP的产物又进行了IP……………………不知道了。对于coIP可以看看这个帖子,希望对你有帮助。
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楼上说的挺好,补充一点:第二次co-IP与第一次恰好相反,是用VHL抗体拉的VHL蛋白和HIF-1a蛋白,VHL蛋白肯定可以拉出来(因为用的VHL抗体),如果VHL蛋白和HIF-1a蛋白在细胞内相互作用(这里可认为相互结合),则可以把HIF-1a蛋白也拉下来。而第一次是用HIF-1a抗体拉的HIF-1a蛋白和VHL蛋白,原理相同。也就是正着拉一次反着拉一次,更有说服力
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