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两种/同粒件一。脂质体制备方法的研.究
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究的启发和所做的贡献均己在学位论文中作了明确的说明并表示了谢
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学位论文作者签名:
签字日期: 年 月 日
年 月 日㈣
论文:两种不同粒径.脂质体制备方法的研究
。、溉硎一~三质体纛枷研究惝㈣
英文缩略词表?
日舌实验:氟尿嘧啶脂质体的制备
讨论结论、
综述:口腔颌面部肿瘤治疗方法的研究进展
作者简介英文缩略词表
一氟尿嘧啶
超滤一紫外头颈部鳞状细胞癌
紫杉醇,顺铂,氟
尿嘧啶光动力疗法
?动脉灌注顺铂,硫, 代硫酸钠全身中
和,结合放疗表皮生长因子受
光动力学检测口腔鳞状细胞癌
白介素人乳头状瘤病毒 表皮生长因子抑
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超滤-紫外可见分光光度法测定钙黄绿素囊泡包封率,紫外分光光度法测定,紫外吸光度测定,紫外分光光度法测定铅,紫外可见分光光度计,紫外分光光度计,紫外分光光度计原理,紫外分光光度法,紫外可见分光光度法,岛津紫外分光光度计
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超滤-紫外可见分光光度法测定钙黄绿素囊泡包封率
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参考实验讲述
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参考实验方案第一部分：LN-NLC-Ni的制备及评价制备将2mgDOGS-NTA-Ni溶于2.2ml甲醇中，得到澄清的溶液，盛放在EP管中待用，按原有处方工艺在西林瓶中制得澄清的油相，将DOGS-NTA-Ni的甲醇溶液加入油相中，稍加热至70℃，再与70℃的水相混合，将混合液小心转入25ml小烧杯中，70℃，乳化40min，以加快乳化过程中甲醇的挥发（在西林瓶中甲醇挥发不完全），制得LN-NLC-Ni。二、评价1.LN-NLC-Ni电位、粒径及其分布的考察2.LN-NLC-Ni包封率及载药量的测定3.红外验证DOGS-NTA-Ni在NLC的表面3.1先将LN-NLC-Ni冷冻干燥成粉末，红外观察DOGS-NTA-Ni和LN-NLC-Ni，看DOGS-NTA-Ni的相关吸收峰是否发生了变化。参考文献如：1760cm-1处是DOGS-NTA-Ni中的羰基；567cm-1是N-Ni键；722cm-1是Ni-O键；cm-1是DOGS-NTA-Ni其他成分产生。在LN-NLC-Ni中有些吸收峰位置有稍微变化，可能是由于所处环境不同造成。本实验如下图：可证明Ni存在于NLC中3.2为减少其他峰的干扰，需进行空白载体实验，对不加药的NLC-Ni和NLC进行红外分析。第二部分：CPP-LN-NLC-Ni的制备及评价制备方案（一）（1）0.5mgCPPs可溶于250μL双蒸水中，浓度为2mg/mL，4℃冷藏，当天使用。（用无菌水溶解时，可置于-20℃冰箱保存几天，在装有新鲜干燥剂的干燥箱内升至室温，大约需要1h左右）。按照CPPs与DOGS-NTA-Ni的质量比分别为1:3，1:2，1:1，2:1，3:1，取6his-taggedCPPs溶液的量分别为：135μL、200μL、400μL、800μL、1200μL，加至4ml（为了在评价实验中够用，因此取4ml反应）LN-NLC-Ni（含Ni为0.8mg）中，水浴混合，室温下持续搅拌，得到CPP-LN-NLC-Ni。（本实验共需5.47mgCPP）（2）可先参照某个比例来确定搅拌时间。先按0.5:1的比例进行反应，在搅拌时间分别为30min、1h、2h、4h时取样进行评价试验（?一次取4ml进行评价，取四次，为了有足够的量进行评价，制得LN-NLC-Ni的制剂总量是否要改为20ml（含Ni的量4mg，需用CPP的量2mg）？?只进行透皮实验进行评价，看搅拌时间是否影响渗透效果），根据结果确定搅拌时间。（3）查阅文献得出搅拌速度影响不大，有的甚至并没有搅拌，因此没有考察搅拌速度（只要有一定的搅拌，使其充分反应即可）。此方案如何看是否充分反应，直接通过透皮实验来看。评价本制备方法中，对处方及工艺的筛选通过粒径、电位、包封率、体外经皮渗透实验（主要）来评价。（0.5ml+1ml+1ml+1ml=3.5ml）制备方案（二）：通过细胞对制剂的摄取效果来确定CPP的用量以及Ni在连接中的作用。1.1荧光探针DID（或FITC）标记NLC（空白）初定将0.1mg荧光染料溶于一定体积甲醇中（将其溶解），加入制得的NLC（无药的空白NLC）中，得FNLC。（参考文献：DID荧光探针的用量为制剂总量的0.001%，因此，需0.1mg荧光探针加入10mL制剂中）1.1.1荧光探针DID（或FITC）标记NLC-Ni1.1.2荧光探针DID（或FITC）标记NLC（无Ni）作为对照制备不加Ni的CPP-NLC在细胞摄取实验中做为对照，根据细胞对CPP-NLC-Ni和CPP-NLC（无Ni）的摄取情况的不同，表现为流式细胞仪测得的细胞内的荧光强度的不同，可得出Ni在CPP与NLC连接中的重要作用。1.2CPP-FNLC的制备将100μLFNLC与10μg，20μg，40μgCPP（参考文献中CPP：Ni=0.5:1，1:1，2:1）室温下反应1h，即得CPP-NLC。1.3细胞培养（培养某肿瘤细胞即可，主要研究CPP穿过细胞膜的能力）参考文献如：1.3.1细胞复苏(1)细胞从液氮中取出立即投入到37℃水浴中。(2)用枪吸取细胞至装有培养基（RPMI）的10mL离心管中，吹打几下，离心管1200r离心4min。(3)离心期间取3.0-4.0mL培养基至小培养瓶(培养皿)中。(4)倒去上清液，加3.0mL培养基，移液枪反复吹打几遍，枪吸取细胞置培养皿中，前后晃动，使细胞充分接触瓶壁。标记好日期、细胞种类、培养基pH值等。观察细胞形态(圆整独立)，喷洒酒精放入细胞培养箱中，在培养箱中将瓶盖拧松至用手稍碰瓶盖即能转动，左右轻晃几次。细胞充分贴壁后，更换培养基。1.3.2细胞传代(1)培养瓶中的细胞覆盖率达到80％时要传代。(2)把原有培养基倒掉，加4mLPBS涮洗，瓶子放平，前后均匀晃动，倒掉。(3)加入4mL胰
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离心超滤法测定石杉碱甲固体脂质纳米粒的包封率
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【求助】测定纳米粒包封率的超滤管的选择
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这个帖子发布于8年零161天前，其中的信息可能已发生改变或有所发展。
我想用超滤管测定纳米粒的包封率，请问哪位用过这种方法的战友，我该选择什么样的大小、型号的超滤管？
我打算买Millipore的，有0.5ml和4ml两种，如果用0.5ml的会不会太小？
看到以前的帖子，说可以用3K和10k试试，再确定用哪一种？那么这两种大概要买多少？最后确定了用哪一种时，需要大概买多少呢？
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能否介绍一下这个超滤管怎么用啊，我以前用的是亚硝酸纳降解法和上柱子分离的方法测得包封率。
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榕树南国 我想用超滤管测定纳米粒的包封率，请问哪位用过这种方法的战友，我该选择什么样的大小、型号的超滤管？
我打算买Millipore的，有0.5ml和4ml两种，如果用0.5ml的会不会太小？
看到以前的帖子，说可以用3K和10k试试，再确定用哪一种？那么这两种大概要买多少？最后确定了用哪一种时，需要大概买多少呢？0.5ml是否太小，主要看你监测所需的药品量，如果用HPLC法测定，一般足够。至于选用3k和10k，主要是看药物的分子量。超滤管测包封率的原理是游离的药物能通过超滤膜进入滤液，而纳米粒被截留。因此如果药物的分子量足够小的话，选择截留分子量越小越好，即3k大于10k。一般说来，药物的分子量应小于截留分子量的1／3，但截留分子量小，过滤较为困难。其实超滤管的选择可以通过回收率试验来验证，即按包封率的测定方法操作，药物溶液测得的包封率为0，空白纳米粒测得的包封率为100％
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