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空气样品采集与处理
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室内环境有害物质采样方法
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&&&讲讲室内空气中菌落总数的检验方法
讲讲室内空气中菌落总数的检验方法
&浏览次数：247&发布时间：&QC检测仪器网
室内空气中菌落总数检验方法：
1 引言　　细菌是自然界中最常见的微生物，其种类繁多，在人类生存的环境中几乎无处不在。自古以来，各种细菌性传染病不断肆虐人类，非典、疯牛病、禽流感 等事件让人们对我们的生存环境有了更高的要求。在人类活动的主要场所的空气中细菌可达到数千个以上。空气中的细菌种类很多，除芽孢杆菌属、无色杆菌属、八叠球菌属等细菌之外，还存在着来自人体的某些病原微生物，如结核杆菌、白喉杆菌、溶血性链球菌、金黄色葡萄球菌、脑膜炎球菌等。
2 检测方法　　目前，对空气中微生物污染的检验已引起许多行业的的重视，一般以细菌和真菌作为检测目标。空气中细菌的检测方法较多，主要有沉降法、撞击法、过滤法、简易定量测定法等。2.1 过滤法抽取一定量的空气，使其通过一种液体吸附剂，然后取此吸附剂定量培养后计算出菌落数。2.2 撞击法用吸风机或真空泵使含菌空气以一定流速穿过狭缝而被吸到营养琼脂培养基平板上，取出后置于37℃恒温箱中培养48h，依空气中细菌密度的大小调节平板转动的速度。最后根据取样时间和空气流量算出空气中的含菌量。2.3 沉降法将盛有培养基的平皿放在空气中暴露一定时间，经培养后计算所生长的菌落数，此法简单，使用普遍，但由于只有一定大小的颗粒细菌在一定时间内才能降到培养基上，因此，所测的细菌含量不够准确，检验结果少于实际细菌量。2.4 简易定量测定法用无菌注射器抽取一定量的空气，压入培养基内进行培养，即可定量、定性测定空气中细菌。
3 国标：GB/T& 室内空气中细菌总数检验方法&& 3.1 仪器和设备高压蒸汽灭菌器、干热灭菌器、恒温培养箱、冰箱、平皿、制备培养基用一般设备：量筒、三角烧瓶、pH计或者精密pH试纸等。撞击式空气微生物采样器采样品金币要求：（1）&&& 对空气中细菌捕获率达95%（2）&&& 操作简单、携带方便、性能稳定、便于消毒营养琼脂培养基成分质量蛋白胨20g牛肉浸膏3g氯化钠5g琼脂15-20g蒸馏水 培养基制法 将上述各成分混合，加热溶解，校正pH至7.4，过滤分装，121℃,20min高压灭菌。3.3 操作步骤一般情况下采样量为30-150L，应根据所使用仪器性能和室内空气微生物污染程度，酌情增加或减少空气采样量。样品采完后，将带菌营养琼脂平板置于36&1℃恒温箱中，培养48h，计数菌落数，并根据采样器的流量和采样时间，换算成每立方米空气中的菌落数，以cfu/m3报告结果。
4 现市场上的检测产品是按照国家标准GB/T推荐的测量空气中菌落检测方法的Anderson原理，设计制作了多款空气采样器。以为药厂、疾病监测中心提供各种不同场合的需要。4.1 空气采样器HAS-100A空气微生物采样器是一种小型便携式采样器。可供医疗卫生、食品工业、发酵工业、制药工业和农牧业以及有关研究部门作空气微生物监测和实验研究的一种新型仪器。主要特点：1. 参数显示采用点阵式液晶屏，操作直观方便；2. 配置大容量镍氢电池，使用时间更长；3. 采样头可灵活旋转，使用方便；4. 在无外接电源情况下显示电池电量，可以提醒用户及时充电；5. 在最后一次按键30s后关闭液晶屏背光，若在非采样状态5分钟后自动关机，节能电源；6. 台式培养皿可以选择旋转模式，采样更均匀。7. 便携式采样头可卸下进行高温消毒。&&空气采样器是采用撞击法原理狭缝式工作方式，针对空气微生物气溶胶捕获能力进行设计。主要特点：1.真空流量控制器。2.撞击头中的狭缝采用优化设计 ，保证气流的层状流动。3.可定时，培养皿可转动，捕获率高。&&&&& 六级空气采样器采用空气气动力原理，真实地模仿人类的肺部的沉积情况进行采集所有微粒。用于监测真菌和细菌的浓度和粒度分布。主要特点：1.六级分层生物气溶胶采样。2.浮游菌和真菌采样。3.开机延时功能。4.2 菌落计数器&&& 国标实验中将细菌培养48h后，需要计算菌落数来计算空气中细菌的含量，恒奥公司生产的HCC型菌落计数器操作简单，只需将培养皿放在电子压力感应垫上，用尖式触笔按顺序点压即可。接触的压力将产生一个计数，计数结果会显示在仪器屏幕上，每计数一个菌落，同时发出声音确认．（语音输出系统可以关闭或者打开）。适合多种笔触的工具一一例如毡尖笔，记号笔等，对培养皿表面施加一定的压力，进行记数。压力感应灵敏度可调。菌落计数具体特点归纳如下：1.半自动点击式计数。&&& 2.可选择明暗视野背景。& 3.内置平均数计算系统。& 4.适用于任何探针式触笔。5.归零功能，重力感应可调。6.光学放大3X、6X。7.LED照明，保护您的眼睛。8.压力敏感度和计数声响可调节。9.可连接电脑，显示记录参数。
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Copyright&&& Inc.All Rights Reserved.环境监测中监测方法的选择-环境监测-
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环境监测中监测方法的选择
　　环境监测是环境保护的基础工作，是环保执法体系的重要组成部分，环境监测的全过程必须严格执行国家各类环境监测技术规范和分析方法标准。环境监测实验室要建立相应的实验室质量控制与管理体系，切实提高环境监测质量，使数据具有代表性、完整性、可比性、精密性和准确性。环境监测不同于一般的化学分析，有监测对象成分复杂、浓度范围宽、随机变化大等特点，故要想用环境监测分析所得的数据来描述这些样品，就必须有良好的环境质量保证作为前提。
　　1.环境监测质量控制内容
　　环境监测对象成分复杂，时间、空间量级上分布广泛，且多变，不易准确测量。在大规模的环境调查中，常需在同一时间内由多个实验室同时参加、同时测定。这就要求各个实验室从采样到监测结果所提供的数据要有准确性和可比性。监测数据的准确性决定了环境管理、环境研究、环境治理以及环保执法等各方面的决策正确与否。环境监测结果由环境监测过程中各个环节的质量予以保证，要求每个基层监测单位都要做好环境质量保证和控制工作。它分为野外采样质量控制和实验室内质量控制。
　　1.1野外采样质量控制
　　野外质量控制主要包括了现场布点、坐标定位(可用GPS高级定位)、样品采集、样品贮存及现场某些项目的预处理等。监测点布设一贯遵循以下原则要求，既能以人为本，又能比较真实全面反映污染物的空间分布和变化规律。基层站监测断面的位置一般由上级站规定，监测点是根据监测目在车间口或总排污口布点。
　　坐标定位是为了详细确定采样点的位置，以便为准确稳定重复采样及绘出采样现场示意图提供保障。
　　采样的目的是为了获得有代表性和完整性的样品，这也是数据具有准确性、精密性和可比性的前提。根据具体采样项目分清采样容器，估算好采样量，选对采样方法和保存方法，特别是特殊项目一定要现场固定，做好采样记录，做平行和空白采样，以检查保存剂的纯度，采样容器、滤器及其设备的污染情况，以便发现系统和偶然误差及采样的再现性等。例如野外水体采样中，为了控制采样过程的误差，将实验室用的纯水在采样现场装入采样瓶中，加入与样品相同的保存剂，并运回实验与样品同时分析，将所测结果与实验室空白比较，不应呈显着差异，其目的是检查采样、保存、运输中所产生的误差。并尽量缩短运输过程，减少震动和碰撞以防样品损失或污染。样品采集后立即送往质控室进行交接，尽快进入分析测试过程。
　　1.2实验室内质量控制
　　实验室内质量控制又称为内部质量控制。它主要表现为分析工作者对分析质量进行自我控制及内部质量人员对其实施质量控制技术管理的过程。监测分析的误差是客观存在的，而监测分析质量控制力求通过采取一系列有效的控制措施将监测误差控制在容许的范围内以保证监测结果的准确度能在给定的置信水平下。
　　良好的实验室环境质量控制包括:1)干净、安静的实验室条件。卫生条件比较差，将会影响仪器的灵敏度，也会污染各种溶液。嘈杂的实验室氛围会影响操作人员的心情，导致实验失败或者产生很大误差。2)精密度和准确度控制。实验室空白实验是为了检查水、试剂和其他条件是否正常。平行测样数目应达到样品测定量的10%，平行样测定值的相对偏差应满足实验室质控指标要求，精密度合格率达95%以上。
　　2.监测方法选择
　　2.1选择依据
　　（1）为了使监测结果具有可比性，应尽可能采用国家现行环境监测的标准统一分析方法，要确保使用标准是现行有效的最新版本。如果因缺少指导书可能影响监测结果时，应选用由知名技术组织或有关科学文献和期刊公布的方法，应经过确认并征得客户同意，对所选定的方法形成文件。
　　（2）除委托性监测或具有试验性质的测试项目可以使用非标准方法或委托方提供的方法外，法定监测、评定性监测和仲裁监测等需要出具证明作用数据和结果的监测均应选择国家标准、行业标准、地方标准。
　　（3）采用非标方法时，应与委托方协商确认并形成有效文件经技术负责人批准，使出具的监测报告为委托方和客户所接受。当客户提出的方法不适合或已经过期时，实验室应明确通知客户，然后监测站应由专人依据国家及行业的标准规则，负责编制作业指导书，主要有抽样方法、样品制备方法、仪器设备操作规程、监测实施细则、仪器设备自校方法、仪器设备运行检查方法和数据修订规则等。
　　2.2新监测方法的采用
　　首先，环境监测部门(如监测站)使用新标准、新方法实施监测时，对所用的仪器设备、环境条件、人员技术等条件应与标准对照并进行验证，以证明本实验室能够正确使用该新标准实施监测。具体步骤为:
　　（1）明确新开展监测项目的标准。
　　（2）编制原始记录表格格式和确定监测报告格式。
　　（3）培训监测人员。
　　（4）相关监测人员负责新项目所需的技术资料、仪器、设备和试剂等。
　　（5）采购部门负责所需物品的购置。
　　（6）新仪器的计量检定，建立仪器档案。
　　（7）按标准规范、监测细则进行试验并记录，形成监测报告并审批。同时应安排一次比对验证试验，确保新开展项目的可靠性。
　　（8）对照标准要求评审监测工作，证实其结果是否符合标准要求。
　　（9）若完全符合要求并经过指定次以上监测后，方可确认。
　　2.3选用监测标准的有效版本
　　监测站对所有与监测工作有关的标准、技术规范、手册、作业指导书等实施受控管理，并通过有效手段和可靠的渠道，对在用的标准、技术规范和监测方法进行不间断的跟踪，定期进行清理或查新，以确保使用的标准是最新有效版本。这些标准和规范在监测场所中可以迅速获取，以方便工作人员使用。
　　2.4监测方法的偏离考虑
　　监测站应建立在例外情况下允许偏离的程序。规定在不背离质量方针和目标、不违背国家法律、法规的条件下，在已取得的资质认定的能力范围内，如客户要求或特殊情况时允许某些偏离。偏离均应被文件规定，经客户同意并有实验室技术负责人批准方可实施，不允许有任何随意的偏离行为。偏离实施时应做好技术记录，并进行后续跟踪加以验证。
　　3.监测数据处理
　　监测站应要求监测人员认真做好监测数据的采集、处理和转换工作，确保监测数据准确、可靠。当使用计算机等设备对检测数据进行采集、处理、记录、报告、存储或检索时，应对出具的数据进行质量控制，制定相关管理程序，以保证数据的完整性。记录测量结果的原始数据必须根据有效数字的保留规则正确书写，对监测的平行样数据要根据Grubbs检验法剔除离群值。审核人员对监测原始记录进行校核，对计算和数据转换做适当的检查后签字。同时做好保密性工作，原始监测数据，由资料员负责保存归档，以便备查。计算机实行专人管理，设置密码，不经允许，任何人不得随意使用。
　　在环境监测工作中，选择合适的监测方法进行监测，是确保监测数据质量的重要环节之一，还必须要有好的质量控制与保证作为前提。监测人员应当不断学习业务知识，熟悉环境监测技术规范、监测分析标准和各项污染物的特点，发扬敬业精神，增强正确执行规范和标准的自觉性，以科学态度对待监测工作，这样才能确保监测数据的准确可靠，更好地为环境管理服务。
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